外阴组织是由正常的人源性阴道上皮细胞和树突状细胞培养而成. 其高度分化的结构与体内组织相似,是女性卫生毒性研究的理想选择, vaginal care, and microbicide products. 外阴有四种类型:

1) VEC-100(图1):含有VEC上皮细胞的上皮组织;

2) VLC-100(图1):上皮组织,包含上皮VEC和具有免疫能力的树突状细胞,

3) VEC-100- ft(图2):VEC-100的全层版本,包括VEC上皮细胞和含有固有层的成纤维细胞, and

4) VLC-100-FT(图2):voc -100- ft的免疫能力版本,其中包括树突状细胞.

EpiVaginal Histology New

Figure 1: H&E染色A) VEC-100的组织学(福尔马林固定)横截面,体外重建含有正常人VEC细胞的上皮组织模型, B)阴道外植组织. 体外和体内组织均显示有核的基底细胞层和上基底细胞层,随后是细胞核缺失和细胞充满糖原的细胞层.

Figure-3

图3:细胞角蛋白免疫染色的VEC-100组织的福尔马林固定横截面, CK13, CK14, & CK18. Basal cells are stained by CK14 and supra-basal cells by CK13; no cells are stained by CK18.

图4:暴露于含有常见杀精剂的配方18小时后,阴道外全层(VEC-100-FT)组织模型的活力(A)和细胞因子释放(B), nooxynol -9 (N9): a) PBS控制, b) KY jelly (KY), c) KY with 2% N9 (2% N9), and d) 0.1% N9 in PBS (0.1% N9). 注:随着组织活力降低,IL-1β释放增加.

Figure-5

图5:局部暴露于60(24小时)后VLC-100组织的HIV-1感染,000 CPM HIV-1 ADA或NL4-3病毒. 暴露后,将组织洗涤3次,然后再培养24小时. 然后提取细胞DNA,使用HIV-1 gag特异性引物对检测HIV-1转录本.

Figure-6

图6:RT - PCR显示:A)器官型阴道-宫颈外(VEC)组织模型和B)人宫颈组织外植体中toll样受体(TLR)的表达.

杀菌剂测试,性病感染研究,女性卫生,炎症,药物输送

Irritation Testing

使用外阴组织测量暴露于女性卫生用品和其他产品后的组织活力和细胞因子释放.

外阴刺激方案

EpiVaginal为女性产品安全测试以及HIV-1和其他性传播疾病的研究提供了一个体外研究工具. 其组织结构和细胞生理与体内阴道上皮组织密切相似, 使其成为毒理学和功效测试的理想选择, 也是生物研究的工具. Browse our reference library 看看研究人员是如何在这些研究领域使用我们的外阴组织的.

Tissue

Kits: 外阴试剂盒VEC-100包含24个组织, VEC-112包含12个组织,VEC-606包含6个组织. (纸巾“包”包含纸巾, 少量培养基, and plasticware; contact 365体育网投 for specific kit contents.)

Substrate: 使用单孔组织培养板插入.

VEC-100: Nunc™单孔组织培养板插入件. Pore Size = 0.4 µm, Inner Diameter = 0.80 cm, Surface Area = 0.5 cm2.

VEC-606: 聚碳酸酯单孔组织培养板插入,Nunc™. Pore Size = 0.4 µm, Inner Diameter = 2.5 cm, Surface Area = 4.2 cm2.

Culture: At air liquid interface.

Histology: VEC-100: 10-16个非角膜组织细胞层.

Lot Numbers: 每个技术员每周生产的纸巾批号被分配到一个特定的批号. 通常,任何一周的纸巾生产都有多个批号. 在批号的末尾附加一个字母,以区分给定批号中的单个试剂盒. 所有组织试剂盒在细胞方面都是相同的, medium, handling, culture conditions, etc.

Shipment: 在4°C培养基中添加琼脂糖凝胶.

Shipment day: Monday.

Delivery: 周二上午通过联邦快递优先服务(美国). 美国以外:周二至周四视地点而定.

Shelf life: 包括运输时间在内,纸巾在使用前可在4°C下保存4天. 但是,除非绝对必要,否则不建议延长储存期. In addition, 如果组织在同一天连续使用,将获得最佳的再现性, e.g. 周三早上,在4°C的温度下过夜.

Length of experiments: 培养可持续至少1周,正常形态保持良好. 培养物必须每隔一天用5.0 ml维持培养基(VEC-100-MM). 细胞培养插入放置在培养架(零件号MEL-STND)或垫圈(零件号EPI-WSHR)在6孔板允许使用5.0 ml.

Alternative tissues:

VEC-100- ft:除了在胶原/阴道成纤维细胞底物(固有层)上生长的组织外,与VEC-100相似。.

VEC-112-FT:除12种组织外,与VEC-100-FT相似.

VLC-100:与VEC-100相似,只是组织中含有朗格汉斯细胞.

VLC-112:与VLC-100相似,除了12种组织.

VLC-100- ft:除了在胶原/阴道成纤维细胞底物(固有层)上生长的组织外,与VLC-100相似.

VLC-112-FT:除12种组织外,与VLC-100-FT相似.

Cells

Type: 正常人宫颈外周细胞(NHEC)分化为非角化组织, 阴道-子宫颈外阴表型(部件号:VEC-100).

Genetic make-up: Single donor.

Derived from: 成人宫颈外组织.

Screened for: 艾滋病毒、乙型肝炎、丙型肝炎、支原体、细菌、酵母菌、真菌.

Medium

Base medium: Dulbecco 's Modified Eagle 's Medium (DMEM)和F12 Medium.

Growth factors/hormones: 表皮生长因子和其他专有因子.

Serum: None.

Antibiotics: 庆大霉素5µg/ml(为庆大霉素正常水平的10%).

Anti-fungal agent: Amphotericin B 0.25 µg/ml.

pH Indicator: Phenol red.

Other additives: Proprietary.

Alternatives: 不含酚红、不含抗生素、不含真菌的培养基和组织. 代理商在发货前3天撤离.

Maintenance medium: VEC-100-MM

质量控制和无菌

Visual inspection: 所有组织都经过目视检查,如果发现物理缺陷, 纸巾被拒绝装运.

End-use testing: 每个批次的组织活力由MTT测定法确定. Tissues are exposed to 1.Triton X-100为30、60和120分钟. 使用MTT测定降低组织活力(ET-50)所需的暴露时间. 将存活率降低到50% (ET-50)所需的暴露时间必须为0.92 – 1.67 hours. 应客户要求,将QC检测结果汇总提供给客户参考. (对于TEER测量,365体育网投已经成功地使用了WPI Endohm系统.)

Sterility: 在整个生产过程中使用的所有介质都要进行无菌检查. 维持培养基加或不加抗生素孵育1周,检查无菌性. 用于运输的24孔板上的琼脂糖凝胶也孵育1周,并检查任何污染迹象.

Screening for pathogens: 所有细胞都经过筛选,使用PCR检测HIV、乙肝和丙肝呈阴性. 然而,没有任何已知的测试方法可以完全保证细胞是无病原体的. Thus, 这些产品和所有人类衍生产品应按照CDC-NIH手册中建议的BSL-2(生物安全等级2)或更高级别处理, 微生物和生物医学实验室的生物安全,” 1998. 如需进一步帮助,请联系您的现场安全专员或365体育网投技术服务.

不合格批件通知: 如果纸巾没有通过我们的质量检验或无菌检验, 我们会通知顾客,并在适当情况下免费更换纸巾. 因为我们的一些QC和无菌检测是在出货后完成的, 我们会尽快发出通知. (在正常情况下,ET-50故障将在周四下午5点前通知.m.; sterility failures will be notified within 8 days of shipment.)

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