黑色素瘤模型由人类恶性黑色素瘤细胞(A375)组成。, 正常的, 人源性表皮角质形成细胞(NHEK)和正常, 人源性真皮成纤维细胞(NHDF)已培养成多层, CM恶性肿瘤不同阶段的高分化表皮伴黑色素瘤细胞. 在文化的不同阶段, 组织呈放射状生长期(RGP), 垂直生长期(VGP), 或转移性黑色素瘤表型. 细胞用无血清培养基在细胞培养插入物上培养, 并在体外皮肤技术的前沿达到分化水平. 在结构上, 黑色素瘤模型与体内黑色素瘤的进展非常相似, 从而为研究提供了有价值的工具, 理解, 并为最严重的皮肤恶性肿瘤之一开发预防和治疗方法.

黑色素瘤模型表现出与活体相似的形态和生长特征,这些特征是均匀的和高度可复制的. 这种全层皮肤模型的表皮由有组织的基底层组成, 尖尖的, 细粒度的, 以及类似于体内发现的角化表皮层. 真皮隔室由含有正常人真皮成纤维细胞(NHDF)的胶原基质组成。.

使用黑色素瘤组织的方案是明确和直接的. 365体育网投的黑色素瘤组织已被用于许多靶向和抗黑色素瘤药物.

图1

图1. 全层黑色素瘤皮肤模型中的人类转移性黑色素瘤细胞(A375. A375细胞在真皮/表皮交界处出现RGP黑色素瘤淋巴结(第11天). 随着培养时间的延长, 黑色素瘤淋巴结呈VGP形态(第18天),随后分离的细胞簇侵入真皮(转移性侵入)(第29天)。. 长箭头表示表皮与真皮交界处的黑色素瘤细胞群. 短箭头显示分离的黑色素瘤细胞团浸润真皮层.

图2

图2. 黑色素瘤FT皮肤模型的超微结构分析.

全层皮肤黑色素瘤模型(MLNM-FT-A375)透射电镜(TEM). A. 黑色素瘤细胞(M)与角质形成细胞(KC)相互作用区域. B. 黑色素瘤细胞与真皮底物相互作用区域(D). N代表原子核,N代表核仁. 箭头表示凋亡的黑色素瘤细胞

图3

图3. 含有转移性SK-Mel-28细胞的全层皮肤黑色素瘤模型(MLNM-FT). S-100抗体染色. 最初黑色素瘤细胞在真皮/表皮交界处形成小巢(第11天). 随后VGP肿瘤出现(第25天),随后观察到转移到真皮(第29天)。. 长箭头表示一些黑色素瘤细胞簇在表皮真皮交界处. 短箭头显示单个黑色素瘤细胞浸润真皮层.

图4

图4. n -钙粘着分子在MLNM-FT-A375全层黑色素瘤皮肤模型中的表达. N-Cadherin抗体染色,40X. N-Cadherin的表达随培养时间的增加而增加.

肿瘤侵袭及抗黑色素瘤药物筛选

365体育网投的黑色素瘤组织呈放射状生长阶段, 垂直生长期, 转移性黑色素瘤的表型, 与体内黑色素瘤的发展平行. 这个模型为肿瘤学家和癌症研究人员提供了一个有价值的研究工具, 理解, 并为最严重的皮肤恶性肿瘤之一开发预防和治疗方法. 浏览我们的黑色素瘤参考文献 365体育网投参考图书馆 看看医生和研究人员是如何使用我们的黑色素瘤组织的.

 

组织:

工具: 全层黑色素瘤皮肤构建(MLNM-FT-A375试剂盒)由24个组织组成. (纸巾“包”包含纸巾, 少量培养基, and plasticware; contact 365体育网投 for specific kit contents.)

基质: 使用单孔组织培养板插入(e.g. 微孔CM单孔组织培养板插入,孔径= 0.4µm,表面积= 0.6 cm2).

文化: 最初在水下,然后在气液界面.

组织学: 上皮:8-12层上皮细胞加上角质层(基底), 尖尖的, and 细粒度的 layers); Dermis: Collagen gel containing fibroblasts. 早期黑色素瘤细胞在真皮/表皮交界处形成淋巴结. 在后期黑色素瘤进展到RGP(放射状生长期), VGP(垂直生长期)并连续侵入真皮成分.

很多数字: 每周生产的纸巾批次都有一个特定的批号. 在批号的末尾附加一个字母,以区分给定批号中的单个试剂盒. 所有组织试剂盒在细胞方面都是相同的, medium, 处理, 培养条件, 等.

装运: 组织在4°C下运输,培养基补充,琼脂糖凝胶在6孔板中.

装运: 周一. 如有特殊要求,也可在星期四装运.

交付: 周二上午通过联邦快递优先服务(美国). 美国以外:周二至周四视地点而定.

保质期: 包括运输时间在内,纸巾在使用前可在4°C下保存3天. 但是,除非必要,否则不建议延长储存期限. 除了, 如果组织在同一天连续使用,将获得最佳的再现性, e.g. 周二下午或之后在4°C下过夜(周三上午).

实验时长: 培养可持续4周,观察黑色素瘤的发展和进展,并保持正常表皮形态. Cultures must be fed every other day using 365体育网投 culture stands (MEL-STND; click on this link for photo) along with 5.0 ml MLNM-FT-MM.

替代组织:

MLNM-FT-A375(第6天) 早期MLNM-FT-A375组织. 组织没有在气液界面培养. 客户收到所需的培养基(MLNM-FT-GM)继续培养和生产MLNM-FT-A375. 由于本产品的专有性质,在订购前需要与365体育网投技术代表进行讨论. 设计用于研究黑色素瘤发展的早期阶段,其中实验设计规定使用早期组织.

MLNM-FT-EXP: 与MLMN-FT-A375相同,只是365体育网投用客户提供的黑色素瘤细胞代替了A375细胞.

细胞:

类型: Human melanoma cells (A375); Normal human epidermal keratinocytes (NHEK); Normal human dermal fibroblasts (NHDF).

来自: 马里gnant melanoma cell line (A375); Neonatal-foreskin tissue (NHEK); Neonatal skin (NHDF);

选择: 人类恶性黑色素瘤细胞SK-Mel-28.

筛选: HIV,乙型肝炎,丙型肝炎,支原体.

介质:

基础培养基: mcdb153基础培养基.

生长因子/激素:表皮生长因子, 胰岛素, 氢化可的松和其他专有的表皮分化刺激剂.

血清: 没有一个.

抗生素: 庆大霉素5µg/ml(为庆大霉素正常水平的10%).

抗真菌剂: 两性霉素B.25µg / ml.

酸碱指示剂: 酚红(0.0012 g/l).

其他添加剂: 用于增强表皮屏障形成的脂质前体(专有).

分析/维护medium: MLNM-FT-MM用于分析以及MLNM-FT-A375组织的长期维护.

质量控制和无菌:

目视检查: 所有组织都经过目视检查,如果发现物理缺陷, 纸巾被拒绝装运.

最终用途测试:保留生产批次的纸巾, 再生长7天, 修复组织学, 和分析.

不育: 在整个生产过程中使用的所有介质都要进行无菌检查. 维持培养基加或不加抗生素孵育1周,检查无菌性. 用于运输的24孔板上的琼脂糖凝胶也孵育1周,并检查任何污染迹象.

病原体筛查: 所有细胞都经过筛选,使用PCR检测HIV、乙肝和丙肝呈阴性. 然而,没有任何已知的测试方法可以完全保证细胞是无病原体的. 因此, 这些产品和所有人类衍生产品应按照CDC-NIH手册中建议的BSL-2(生物安全等级2)或更高级别处理, 微生物和生物医学实验室的生物安全,” 1998. 如需进一步帮助,请联系您的现场安全专员或365体育网投技术服务.

不合格批件通知: 如果纸巾没有通过我们的质量检验或无菌检验, 我们会通知顾客,并在适当情况下免费更换纸巾. 因为我们的QC和无菌检测是在出货后完成的, 我们会尽快发出通知(在正常情况下,我们会在装运后8天内发出通知).

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