365体育网投的黑色素皮肤系统由正常的, 人源性表皮角质形成细胞(NHEK)和黑色素细胞(NHM)培养形成多层, 人表皮的高度分化模型. 共培养中的NHM发生黑色素形成，导致组织色素沉着. 黑素真皮是使用无血清培养基生产的，不含人工刺激黑素形成的物质，如TPA和IBMX. 培养物生长在空气-液体界面的组织培养插入物上, 允许局部应用皮肤美白剂或自晒黑剂. 黑种人提供了一种有用的体外手段来评估化妆品和药物制剂，旨在调节皮肤色素沉着.
黑皮具有与活体相似的形态和超微结构特征，具有均匀性和高度可复制性. 位于黑色素真皮基底细胞层的NHM是树突状的，自发产生黑色素颗粒，逐渐填充组织层. 培养3周, 黑色素真皮组织变得越来越色素沉着，保持正常上皮形态. Tissues containing NHM derived from black donors show increased pigmentation versus those containing Caucasian-derived or Asian-derived NHM; all three types of cultures are distinctly darker than NHM-free tissues (表皮TM). 局部应用已知的黑色素生成抑制剂可显著减少黑色素的产生和宏观变黑. 相反, 组织内的NHM会对已知的黑色素生成刺激物产生反应, 如α-促黑素细胞激素和β-成纤维细胞生长因子, 产生的组织比未经处理的组织变黑得更快. 近20年来，黑种人的直接检测方法已被纳入实验室的整体检测策略. 有几十个技术参考资料可用, 越来越多的数据表明，黑种人提供了一种廉价而有效的评估皮肤色素沉着的方法，同时避免了物种外推和使用实验动物.
黑种人提供了一种廉价而有效的评估皮肤色素沉着的方法，同时避免了物种外推和使用实验动物. 简单的协议和早期细胞端点的评估使科学家能够在几天内获得数据, 不是几周或几个月.
皮肤亮
使用SOLVABLE™黑色素测定法进行定量测定以确定组织中的黑色素含量. 这个试验可以用来测试皮肤美白功效的最终化妆品配方.
色素的研究
黑种人已被用于研究皮肤色素沉着的生理机制.
组织:
工具: 标准黑种人™试剂盒(MEL-300)由24个单独的组织组成，每个组织直径9毫米. (纸巾“包”包含纸巾, 少量培养基, and plasticware; contact 365体育网投 for specific kit contents.)
基质: 化学修饰，胶原涂层，9毫米ID单孔组织培养板插入使用.
培养:在气液界面.
播种率: Nhm: nhek = 1/10. 可根据要求提供1/30的比例.
组织学: 8-12个细胞层(基底层、棘层和颗粒层).
角质层: 10-15层(基于TEM).
很多数字: 每个技术员每周生产的纸巾批号被分配到一个特定的批号. 通常，任何一周的纸巾生产都有多个批号. 在批号的末尾附加一个字母，以区分给定批号中的单个试剂盒. 所有组织试剂盒在细胞方面都是相同的, medium, 处理, 培养条件, 等.
装运: 在4°C培养基中，琼脂糖凝胶在24孔板中.
装运: 每星期一. 如有特殊要求，也可在星期四装运.
交付: 周二上午通过联邦快递优先服务(美国). 美国以外地区:周二至周三，视地点而定.
保质期: 包括运输时间在内，纸巾在使用前可在4°C下保存6天. 但是，除非必要，否则不建议延长储存期限. 除了, 如果组织在同一天连续使用，将获得最佳的再现性, e.g. 周二下午或之后在4°C下过夜(周三上午).
实验时长: 培养可持续至少2周，保持良好的正常表皮形态. 培养物必须每隔一天用5.0毫升新维护培养基(EPI-100-NMM-3)或epi - 100 nmm - 113. 细胞培养插入放置挂顶板(HNG-TOP-12，提供)，允许使用5.0 mL.
替代组织:
MEL-300-A(或-B或-C)-EACH: 与MEL-300相同，除了只有1个组织，而不是24个组织.
MEL-300-A(或-B或-C) -FRZN-EA: 经过3次冻融循环的MEL-300-B组织. 设计用于黑色素测定的对照.
Mel-301 (-a， -b， -c): 比MEL-300少培养3天，比MEL-300分化少
Mel-312 (-a， -b， -c): 与MEL-300 (-A， -B， -C)相同，除了每个试剂盒12个组织而不是24个.
Mel-606 (-a， -b， -c): 与MEL-300 (a)相同, -B, -C)除了每包6张纸巾, 每个组织在直径较大的细胞培养插入物(ID = 22 mm)中培养.
mel -300英尺(-a， -b， -c): Full-thickness human skin tissue model composed of fibroblast-containing collagen matrix (dermis); normal human epidermal keratinocytes, 正常的人类黑素细胞(表皮). 每包24张纸巾.
细胞:
类型: a) Normal human epidermal keratinocytes (NHEK); b) Normal human melanocytes (NHM).
基因组成: NHEK和NHM分别来自不同的捐赠者. 含有匹配的NHEK和NHM的组织可根据特殊要求提供.
民族起源: 含NHM的白种人黑色素皮(MEL-300-C), 非裔美国人(梅尔- 300 b), 以及亚洲(MEL-300-A)捐助者.
来自: Neonatal-foreskin组织.
选择: 有限数量的NHEK菌株 & NHM来自成人乳房组织.
筛选: 艾滋病毒，乙型肝炎和丙型肝炎.
介质:
基础培养基: Dulbecco 's Modified Eagle 's Medium (DMEM).
生长因子/激素: 表皮生长因子, 胰岛素, 氢化可的松, 以及其他专有的表皮分化刺激物.
血清: 没有一个.
抗生素: 庆大霉素5µg/mL(为庆大霉素正常水平的10%).
抗真菌剂: 两性霉素B.25µg / mL.
酸碱指示剂: 酚红.
其他添加剂: 用于增强表皮屏障形成的脂质前体(专有).
选择: 无酚红(MEL-300-B-PRF), 不需抗生素(梅尔- 300 b -沛富), anti-fungal-free(梅尔- 300 b -等于off), 不含氢化可的松的培养基和组织(MEL-300-B-HCF)可用. 代理商至少在发货前3天被移除.
维护中: 建议使用三种维护介质.
对于长期的实验，其中色素沉着和组织学是重要的, EPI-100-NMM-3的使用, epi - 100 nmm - 113, 或epi - 100 - llmm - 3所示.
EPI-100-NMM-3(新维持培养基)含有保留组织学的KGF，但不含任何直接促进色素沉着的因素.
epi - 100 nmm - 113含有KGF, βfgf, 和α-MSH，促进色素沉着和组织保持.
长寿命保养介质, epi - 100 - llmm - 3所示, 含有高水平的α-MSH和βfgf, 也含有与EPI-100-NMM-3和EPI-100-NNM-113相同水平的KGF. LLMM-3中组织变暗最快，NMM-113变暗较慢，NMM-3变暗最慢.
当添加5时，组织保留效果最好.每48小时0 mL培养基.
质量控制和无菌:
目视检查: 所有组织都经过目视检查，如果发现物理缺陷, 纸巾被拒绝装运. 在显微镜下检查选择的组织，以确保黑色素细胞可见(对于MEL-300-B和MEL-300-A组织)，并确保它们均匀分布在整个组织中.
最终用途测试: 组织继续培养，以确保肉眼组织变暗. 将组织暴露在1% Triton X-100中5小时. 每批组织的5小时存活率必须超过35%，由MTT测定(参见365体育网投表皮™ET-50方案)确定.
不育: 在整个生产过程中使用的所有介质都要进行无菌检查. 维持培养基加或不加抗生素孵育1周，检查无菌性. 用于运输的24孔板上的琼脂糖凝胶也孵育1周，并检查任何污染迹象.
病原体筛查: 所有细胞都经过筛选，使用PCR检测HIV、乙肝和丙肝呈阴性. 然而，没有一种已知的测试方法可以完全保证细胞是无病原体的. 因此, 这些产品和所有人类衍生产品应按照CDC-NIH手册中建议的BSL-2(生物安全等级2)或更高级别处理, 微生物和生物医学实验室的生物安全,” 1998. 如需进一步帮助，请联系您的现场安全专员或365体育网投技术服务.
不合格批件通知: 如果纸巾没有通过我们的质量检验或无菌检验, 我们会通知顾客，并在适当情况下免费更换纸巾. 因为我们的QC和无菌检测是在出货后完成的, 在一般情况下，我们会尽快发出通知, 可行性失败将在周三下午5点前通知.m.; sterility failures will be notified within 8 days of shipment).
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